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慧榮和全自動(dòng) AMES 儀是一臺依據 AMES 實(shí)驗 ( 細菌回復突變實(shí)驗 ) 標準流程開(kāi)發(fā)的自動(dòng)化實(shí)驗儀器。該儀器將底層培養基分裝、加樣、移液、混勻、鋪板等一系列操作實(shí)現全自動(dòng)化,實(shí)驗過(guò)程中無(wú)需人工值守,可極大減少 AMES 實(shí)驗初期繁復的人工操作,減少人為誤差,提高實(shí)驗效率和實(shí)驗精度。
Ames試驗是較受重視的快速初篩化學(xué)致癌物的試驗方法。Ames試驗是快速地鑒別化學(xué)品、新農藥和新食品添加劑的致癌性,作為致癌物質(zhì)的篩選法而被廣泛應用, 可以檢測許多物質(zhì)的致癌性。Ames試驗已廣泛應用于醫藥研究、食品和化妝品行業(yè),以及環(huán)境毒理學(xué)和環(huán)境監察等領(lǐng)域。這種試驗可以快速準確地判斷某種化學(xué)物質(zhì)的致突變性和潛在致癌性,從而避免了對于人類(lèi)和環(huán)境的危害。Ames試驗具有操作簡(jiǎn)單、成本低、速度快等優(yōu)點(diǎn),是一種非常重要的現代化毒理學(xué)試驗方法。
1) GB 15193.4-2014 食品安全國家標準 細菌回復突變試驗。
2) YY/T 0127.10-2009 口腔醫療器械生物學(xué)評價(jià).第2單元:試驗方法.鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌回復突變試驗(Ames試驗)。
慧榮和全自動(dòng) AMES 儀適用用于檢測食品、保健品、化妝品、藥品和新化合物等的致突變性。
Ames試驗與HPRT試驗兩種方法對6種氧化型染發(fā)劑的檢測[1]
采用慧榮和全自動(dòng) AMES 儀,通過(guò)細菌回復突變試驗(Ames試驗)和體外哺乳動(dòng)物細胞基因突變試驗(HPRT試驗)兩種方法檢測氧化型染發(fā)劑,并對其結果進(jìn)行分析比較,探討兩種方法在檢測氧化型染發(fā)劑致突變性中的應用。
將5 種試驗菌株分別接種于8 mL營(yíng)養肉湯中,于37 ℃培養12 h,菌液劃線(xiàn)接種于預先制備的相應的主平板中,TA97a、TA98 和TA100接種于氨芐-青霉素主平板,TA102接種于四環(huán)素主平板,TA1535接種于組氨酸-生物素主平板。37 ℃培養48 h,待長(cháng)至典型菌落后置2~8 ℃冰箱保存。試驗前,分別從主平板上選取相應單菌落接種于25 mL營(yíng)養肉湯增菌培養,即置于37 ℃恒溫培養箱中振蕩(100次/min)培養10 h,備用。
根據受試物的毒性和溶解度,在加S9和不加S9代謝物活化系統條件下分別進(jìn)行試驗,各受試物分別設4個(gè)劑量組,同時(shí)設空白對照組、溶劑(滅菌水)對照組及陽(yáng)性對照組。在加S9 條件下,TA97a、TA98 和TA100 以DMSO 溶解的2-氨基芴為陽(yáng)性對照,濃度為10.0 μg/皿;TA102以DMSO溶解的1,8-二羥蒽醌為陽(yáng)性對照,濃度為 50.0 μg/皿;TA1535 以DMSO 溶解的2-氨基蒽為陽(yáng)性對照,濃度為3.0 μg/皿。在不加S9條件下,TA97a和TA98以50.0 μg/皿的敵克松水溶液為陽(yáng)性對照;TA100 和 TA1535 以 1.5 μg/皿的疊氮化鈉水溶液為陽(yáng)性對照;TA102 以4.0 μg/皿的絲裂霉素C水溶液為陽(yáng)性對照。用全自動(dòng)Ames 實(shí)驗儀按技術(shù)規范的要求設置儀器參數進(jìn)行試驗,即2.0 mL頂層培養基、0.1 mL 菌液、0.1 mL 相應受試物、0.5 mL S9或0.5 mL PBS,待平皿冷凝固化后,倒置于37 ℃生化培養箱里培養48 h,計數每皿回變菌落數。計算各菌株各劑量3個(gè)平板回變菌落數的均值和標準差。
受試物誘發(fā) TA97a、TA98、TA100、TA102 回變菌落數是溶劑對照組的2 倍或2 倍以上,受試物誘發(fā)TA1535 的回變菌落數是溶劑對照組的3 倍或3 倍以上,并出現以下情形之一,則該受試物判定為致突變陽(yáng)性:①呈劑量-反應關(guān)系;②任何一個(gè)劑量條件下,出現陽(yáng)性反應并有可重復性。受試物經(jīng)上述5 個(gè)試驗菌株測定后,只要有1 個(gè)試驗菌株,無(wú)論在加S9或不加S9條件下為陽(yáng)性,均可報告該受試物細菌回復突變試驗為致突變陽(yáng)性。反之為陰性。
[1]陳秀娟,李培寧,江漪,等.Ames試驗與HPRT試驗兩種方法對6種氧化型染發(fā)劑的檢測[J].癌變.畸變.突變, 2023, 35(1):57-62.
1) 全自動(dòng) AMES 儀是一臺依據 AMES 實(shí)驗 ( 細菌回復突變實(shí)驗 ) 標準流程開(kāi)發(fā)的自動(dòng)化實(shí)驗儀器。
2) 該儀器將底層培養基分裝、加樣、移液、混勻、鋪板等一系列操作實(shí)現全自動(dòng)化,實(shí)驗過(guò)程中無(wú)需人工值守,可極大減少 AMES 實(shí)驗初期繁復的人工操作,減少人為誤差,提高實(shí)驗效率和實(shí)驗精度。
3) 優(yōu)質(zhì)的售后技術(shù)服務(wù),協(xié)助用戶(hù)進(jìn)行相關(guān)設備及實(shí)驗活動(dòng)評審。